E. D. Mytsa, L.Yu. Kokaeva, S.N. Elansky
Oomycete Phytophthora orang infestan (Mont) de Bary menyebabkan larut malam, penyakit berbahaya kentang dan tomato. Salah satu sumber utama inokulum primer P. infestans adalah struktur pembiakan rehat berdinding tebal - oospora.
Oospora hibrid yang terbentuk sebagai hasil penyebaran strain ibu bapa yang berbeza secara genetik menyumbang kepada peningkatan kepelbagaian genotip pada populasi, akibatnya proses penyesuaian strain ke varietas baru dan racun kulat yang digunakan dipercepat.
Pembentukan ovarium P. infestans di lapangan terkenal di banyak negara di dunia: Rusia (Smirnov et al., 1999), Norway (Hermansen et al., 2002), Sweden (Strömberg et al., 2001), Belanda (Kessel et al., 2002) dan lain-lain wilayah. Oospora mampu bertahan selama lebih dari 2 tahun di dalam tanah dalam keadaan yang berdaya maju (Bødker et al., 2006) dan menyebabkan jangkitan tumbuh-tumbuhan selepas musim sejuk (Ulanova et al., 2010; Lehtinen et al., 2002).
Sebelumnya ditunjukkan bahawa daun tanaman dari pelbagai jenis semak kentang mempunyai perbezaan ketahanan terhadap hama akhir; ia meningkat dari daun bawah ke bahagian atas. Kecenderungan ini tidak bergantung pada usia daun, usia tanaman, atau varieti kentang (Vesper et al., 2003). Pada masa yang sama, kami tidak dapat mencari data mengenai perbezaan intensiti pembentukan oospore pada daun berlainan lapisan semak kentang dalam literatur. Namun, jika terdapat perbezaan tersebut, maka mereka harus dipertimbangkan ketika mengambil sampel daun untuk analisis pembentukan oospore dan ketika menafsirkan hasil yang diperoleh oleh penulis lain. Tujuan kerja ini adalah untuk mengkaji pembentukan oospora di daun terasing dari lapisan berlainan tanaman kentang, yang diletakkan dalam keadaan yang sama di ruang lembab.
Bahan dan kaedah
Kami menggunakan 5 isolat P. infestans pelbagai jenis kawin yang diasingkan dari sampel yang terjejas yang dibawa dari wilayah Moscow, Ryazan dan Leningrad. Dari jumlah tersebut, 3 pasang jenis jenis kawin yang berbeza dipilih, memberikan oospora yang banyak ketika diuji dalam medium agar oat.
Untuk ujian, kami menggunakan tanaman kentang bebas virus dari jenis berikut yang ditanam di rumah hijau (di substrat gambut): Sandrin awal, Zorachka, Uladar, Osiris, Ilyinsky pertengahan awal, Yanka pertengahan musim.
Daun sederhana dari pelbagai peringkat tanaman kentang dipilih untuk dianalisis. Tiga daun dipilih dari tingkat bawah (4 daun majmuk bawah), tiga dari atas (3-4 daun majmuk di atas), dan tiga daun dari pusat semak. Daun sederhana ditimbang, difoto di atas kertas koordinat (untuk mengira isipadu dan luasnya), dan kemudian diletakkan terbalik di permukaan air steril, dituangkan 25 ml ke dalam piring Petri. Kemudian setiap daun dijangkiti dengan satu tetes suspensi campuran zoosporangia mengasingkan A1 dan A2 dari jenis kawin. Untuk tiga daun yang dikumpulkan dari setiap peringkat, digunakan satu inokulum tiga pasang isolat yang berbeza. Satu daun dijangkiti dengan campuran inokulum sepasang isolat.
Untuk menyediakan penggantungan zoosporangia, isolat dari pelbagai jenis kawin ditanam pada medium oat agar selama 7 hari, selepas itu zoosporangia dibasuh dengan air suling steril. Kepekatan inokulum adalah 5-7 zoospora dalam bidang pandangan mikroskop pada pembesaran 80x. Setiap daun dijangkiti satu tetes penggantungan campuran zoosporangia mengasingkan jenis kawin A1 dan A2.
Dalam semua eksperimen, 3 daun kentang digunakan setiap varian. Setelah inkubasi selama 20 hari pada suhu 18 ° C, setiap daun diselaraskan dalam mortar dengan 2 ml air suling. Dari suspensi yang dihasilkan, 3 sampel diambil, dari mana persiapan untuk mikroskopi dibuat.
Dalam setiap varian, 180 bidang penglihatan diperiksa, setelah itu jumlah oospora dihitung kembali per 1 mm2 permukaan kepingan. Hasil penghitungan untuk setiap varian adalah rata-rata.
Untuk mengira selang keyakinan (μ) untuk tahap keertian 0,05, formula berikut digunakan
di mana s adalah sisihan piawai, n adalah jumlah pengukuran, t adalah pemalar ujian-t untuk aras keertian 0,05. Semua pengiraan dilakukan dalam Excel (pakej Microsoft Office).
Keputusan dan perbincangan
Inokulasi daun yang dikumpulkan dari lapisan semak kentang yang berlainan dan diletakkan dalam keadaan yang sama di ruang lembap menunjukkan perbezaan intensiti pembentukan oospore. Dalam semua jenis yang dikaji, jumlah maksimum oospora terbentuk semasa inokulasi daun yang dikumpulkan dari lapisan bawah dan tengah semak. Tidak terdapat perbezaan yang signifikan dalam pembentukan oospora pada daun bawah dan tengah.
Jumlah minimum oospora terbentuk di daun lapisan atas (Gbr. 1).
Di daun lapisan bawah dan tengah, jumlah maksimum oospora terbentuk dalam varietas Sandrin, Ilyinsky, Zorachka, Uladar dan Osiris. Mereka terbentuk agak kurang intensif di daun varieti Yanka. Jumlah maksimum oospora pada daun lapisan atas diperhatikan pada daun varieti Uladar, kemudian Zorachka, Osiris, Yanka, Ilyinsky, Sandrin mengalami penurunan, tetapi tidak semua perbezaan signifikan secara statistik.
Gambar: 1. Pembentukan oospora di daun berlainan lapisan semak kentang. Yang lebih rendah adalah daun dari tiga tingkat bawah semak, yang atas adalah 3-4 daun kompleks dari bahagian atas tanaman, yang tengahnya dari tengah semak.
Bar ralat menunjukkan selang keyakinan untuk tahap keertian 0,05.
Di lapangan, keadaan mikroklimatik juga menyumbang kepada pembentukan oospora di daun bawah dan tengah semak: kelembapan yang lebih tinggi, pengurangan insolasi matahari, dan turun naik suhu harian (Harrison, 1992). Penyemburan teratas menghasilkan kurang racun perosak di bahagian bawah dan tengah semak. Untuk mengurangkan pembentukan oospora, teknologi harus digunakan yang memungkinkan berjaya menyebarkan racun kulat ke bahagian bawah dan tengah semak. Hasil yang baik dapat diperoleh dengan menggunakan penyembur udara bergolak dan racun kulat sistemik yang dapat merebak ke bahagian semak yang tidak dirawat.
Karya ini disokong oleh Yayasan Sains Rusia (projek No. 14-50-00029).
Artikel itu diterbitkan dalam jurnal "Potato Protection" (No. 2, 2015)